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实验技能SOP:实验动物尿液采集的标准操作规程(SOP)
作者: 来源: 2014-08-08

  关键词:尿液采集 操作规程

  目的:采集各种实验动物的尿液,以用于实验

  主体内容:

  常用的采集方法较多,一般在实验前需给动物灌服一定量的水.

  (一)代谢笼法:此法较常用,适用于大、小鼠.将动物放在特制的笼内.动物排便时,可以通过笼子底部的大小便分离漏斗将尿液与粪便分开,达到采集尿液的目的.

  由于大、小鼠尿量较少,操作中的损失和蒸发,各鼠膀胱排空不一致等原因,都可造成较大的误差,因此一般需收集5小时以上的尿液,最后取平均值.

  (二)导尿法:常用于雄性兔、狗.动物轻度麻醉后,固定于手术台上.由尿道插入导尿管(顶端应用液体石蜡涂抹),可以采到没有受到污染的尿液.

  (三)压迫膀胱法:在实验研究中,有时为了某种实验目的,要求间隔一定的时间,收集一次尿液,以观察药物的排泄情况.动物轻度麻醉后,实验人员用手在动物下腹部加压,手要轻柔而有力.当加的压力足以使动物膀胱括约肌松驰时,尿液会自动由尿道排出.此法适用于兔、狗等较大动物.

  (四)输尿管插管法:动物麻醉后,固定于手术台上.剪毛、消毒 ,于耻骨联合上缘之上在正中线做皮肤切口(长约3~4cm),沿腹中线切开腹壁及腹膜,找到膀胱翻出腹外.辨认清楚输尿管进入膀胱背侧的部位(膀胱三角)后,细心地分离出两侧输尿管,分别在*近膀胱处穿线结扎.在离此结扎点约2cm 处的输尿管近肾段下方穿一根丝线.用眼科剪在管壁上剪一斜向肾侧的小切口,分别插入充满生理盐水的细塑料管( 插入端剪成斜面),用留置的线结扎固定.可见到尿滴从插管中流出( 头几滴是生理盐水),塑料管的另一端与带刻度的容器相连或接在记滴器上,以便记录尿量. 在适用过程中应经常活动一下输尿管插管,以防阻塞.在切口和膀胱处应盖上温湿的生理盐水纱布.

  (五)膀胱插管法:腹部手术同输尿管插管.将膀胱翻出腹外后,用丝线结扎膀胱颈部,阻断它同尿道的通路.然后在膀胱顶部避开血管剪一小口,插入膀胱漏斗,用丝线做以荷包缝合固定.漏斗最好正对着输尿管的入口处.注意不要紧贴膀胱后壁而堵塞输尿管.下端接橡皮管插入带刻度的容器内以收集尿液.

  (六)穿刺膀胱法:动物麻醉后固定于手术台上,在耻骨联合之上腹正中线剪毛,消毒后进行穿刺,入皮后针头应稍改变一下角度,以避免穿刺后漏尿.

  (七)剖腹采尿法:同穿刺法做术前准备,皮肤准备范围应大一点.剖腹暴露膀胱,操作者的左手用无齿小平镊夹住一小部分膀胱,右手持针在小镊夹住的膀胱部位直视穿刺抽取尿液.可避免针头贴在膀胱壁上而抽不出尿液.

  (八)反射排尿法:适用于小鼠,因小鼠被人抓住尾巴提起时排便反射比较明显.故需采取少量尿液时,可提起小鼠,将排出的尿液接到带刻度的容器内.

  主要参考:我们学校动物实验中心的实验动物各种体液、骨髓的采集方法